期刊简介

  中国卫生检验杂志在全国疾病预防控制中心、卫生检验监测中心、商品检验系统、出入境检验检疫、环境监测、各高等院校及医学公共卫生学院、科研院所、食品、水质、化工、制药等行业具有广泛的影响。

  办刊宗旨:《中国卫生检验杂志》集医学、药学及相关政策法规于一体,力争站在当今世界医药科技发展的最前沿,突出'前瞻性、实用性、指导性、科学性',积极协助我国临床医药工作者,及时了解国家食品药品监督管理的政策和法规,掌握国内外医药科技产品的最新发展和治疗学进展的最新动向,不断提高自身的法制观念、理论素养和诊疗水平,以更好地满足广大人民群众对高水准医疗服务不断增长的社会需求,促进我国医药科技事业的良性发展。

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  • 杂志名称:中国卫生检验杂志
  • 主管单位:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会
  • 国际刊号:1004-8685
  • 国内刊号:41-1192/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:美国化学文摘(CA)收录期刊收录:万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国卫生检验杂志2013年第13期

pIRES2-EGFP-SyK(L)载体构建及稳定转染喉癌Hep-2细胞株的建立

李志海;蔡志毅;陶宝鸿;金巧智

关键词:脾酪氨酸激酶, 真核表达载体, Hep-2细胞, 基因表达
摘要:目的 构建Syk(L)全长结构基因真核表达载体,建立稳定高表达Syk(L)的喉癌hep-2细胞系.方法 化学合成结合PCR拼接SyK(L)基因,插入pMD18-simpleT载体中,测序验证正确后经XhoⅠ和Hind Ⅲ双酶切,经T4 DNA连接酶,将其与同样双酶切处理pIRES2-EGFP载体连接,构成新的重组质粒pIRES2-EGFP-SyK(L),测序验证正确后,以脂质体法转染喉癌Hep-2细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的Hep-2细胞株,用实时荧光定量PCR检测SyK(L)的mRNA表达.结果 成功构建了pIRES2-EGFP-SyK(L)真核表达载体;建立了稳定转染pIRES2-EGFP-SyK(L)的Hep-2细胞株;实时荧光定量PCR结果表明pIRES2-EGFP-SyK(L)转染Hep-2细胞株中SyK(L) mRNA表达水平明显高于空载体pIRES2-EGFP转染细胞株及空转染细胞株,差别有统计学意义(P<0.01).结论 pIRES2-EGFP-SyK(L)真核表达载体的构建及稳定高表达SyK(L)喉癌Hep-2细胞株的建立,为进一步研究SyK(L)对喉癌细胞生物功能的影响奠定了良好的实验基础.