期刊简介
中国卫生检验杂志在全国疾病预防控制中心、卫生检验监测中心、商品检验系统、出入境检验检疫、环境监测、各高等院校及医学公共卫生学院、科研院所、食品、水质、化工、制药等行业具有广泛的影响。
办刊宗旨：《中国卫生检验杂志》集医学、药学及相关政策法规于一体，力争站在当今世界医药科技发展的最前沿，突出'前瞻性、实用性、指导性、科学性'，积极协助我国临床医药工作者，及时了解国家食品药品监督管理的政策和法规，掌握国内外医药科技产品的最新发展和治疗学进展的最新动向，不断提高自身的法制观念、理论素养和诊疗水平，以更好地满足广大人民群众对高水准医疗服务不断增长的社会需求，促进我国医药科技事业的良性发展。
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- 杂志名称：中国卫生检验杂志
- 主管单位：中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会
- 国际刊号：1004-8685
- 国内刊号：41-1192/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：美国化学文摘（CA）收录期刊收录：万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
实时荧光定量PCR检测铜绿假单胞菌主动外排泵基因mRNA方法的建立及初步应用
吴春明；宋建新；曹家麟；朱小区；欧阳钦
关键词：铜绿假单胞菌, 荧光定量PCR, 主动外排泵
摘要：目的:建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR的方法,用于定量检测铜绿假单胞菌MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM、MexGHI-OpmD 5种外排泵基因转录水平的表达.方法:采用分子克隆技术,构建克隆载体pMD18-T-mexB、pMD18-T-mexD、pMD18-T-mexF、pMD18-H-mexF、pMD18-T-mexY及pMD18-T-rpsL作为定量模板,梯度稀释后进行SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR,绘制定量标准曲线,建立检测铜绿假单胞菌5种外排泵基因mRNA的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR的方法,并采用上述方法检测30株铜绿假单胞菌的5种外排泵表达情况.结果:rpsL、mexB、mexD、mexF、mexH、mexY标准曲线的线性范围分别为:104～109拷贝/μl,102～109拷贝/μl,105～109拷贝/μl,105～108拷贝/μl,104～107拷贝/μl,103～109拷贝/μl;斜率分别为:-3.008、-3.206、-3.126、-3.177、-3.024、-3.213;相关系数分别为0.99998、0.99954、0.99912、0.98845、0.98356、0.99962.30株多重耐药Pa中,16株高表达MexAB-OprM(53.33%),7株高表达MexCD-OprJ(23.33%),8株高表达MexEF-OprN(26.67%),2株高表达MexGHI-OpmD(6.67%),3株高表达MexXY-OprM(10%).结论:建立的FQ-RT-PCR方法简便、快速,特异性强,可信度高,可用于铜绿假单胞菌外排泵表达的快速定量检测.
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